自50年代初庫爾特先生發(fā)明了粒子計數(shù)技術之后便誕生了第一臺血細胞分析儀并應用于臨床以來,血細胞分析儀的發(fā)展已有50年的歷史.血細胞分析儀實質(zhì)上是指對一定體積內(nèi)血細胞數(shù)量及異質(zhì)性進行分析的儀器.最初的血細胞計數(shù)儀(Cell Counter)僅能計數(shù)紅細胞(RED)和白細胞(WBC),后來又有了血紅蛋白(HBG),血小板(PLT),紅細胞壓積(HCT),平均紅細胞體積(MCV)等幾個參數(shù).而發(fā)展成為血細胞分析儀(Hematology Analyzer)后,又增加了許多分析和計算參數(shù),如紅細胞體積分布寬度(RDW),平均血小板體積(MPV),血小板體積分布寬度(PDW),血小板壓積(PCT),大血小板比率,白細胞三分群,白細胞五分類,血紅蛋白濃度分布寬度,異常淋巴細胞提示,幼稚細胞提示等各種參數(shù)和功能也不斷地添加到一些品牌的儀器上.同時也為以醫(yī)療器械公司帶來機遇與挑戰(zhàn)

        電阻檢測法的基本原理是:在待測液體中置一微孔,在微孔的兩端各加一定電壓的電極,當液體中的顆粒巾進經(jīng)過微孔時,電極間的電阻就會產(chǎn)生訓瞬間的變化,以因而產(chǎn)生電脈沖,對這種電脈沖進行計數(shù)就可得到顆粒的數(shù)量,脈沖幅度的大小表示顆粒的體積的大小,經(jīng)過對各種細胞所產(chǎn)生脈沖的大小的電子的選者擇,可以區(qū)分出不同種類的細胞;在液體中加上一定的負壓就能使經(jīng)過微孔的液體流動.

        隨著電子技術,流式細胞技術,激光技術,電子計算機技術和新熒光化學物質(zhì)等多種高科技技術在臨床檢驗工作的應用,使血細胞分析儀在自動化程度,先進功能和完美設計方面提高到了一個嶄新的階段,血細胞分析儀已經(jīng)不僅僅局限在進行常規(guī)的血細胞分析,還增加了許多擴展功能,例如將網(wǎng)織紅細胞(RET)的計數(shù)和分析功能加入其中,一些儀器還另外增加了幼稚細胞分析和有核紅細胞分析功能,甚至對血液細胞中某些寄生蟲進行提示,更有一些儀器把流式細胞分析儀的某些功能和并到血細胞分析儀上,在進行常規(guī)血細胞分析時可得到某些淋巴細胞亞群的分析結果.

        在常規(guī)血細胞計數(shù)儀上,紅細胞(RBC),血小板(PLT)共用一個測量通道,血紅蛋白含量(HGB)的測定在任何類型,檔次的儀器中其測試原理都是相同的.白細胞的計數(shù)和分類有其專用的通道,現(xiàn)我們就對分析儀上各測試項目所使用的技術方法和原理作些簡要介紹.

一、血紅蛋白含量測定

        血紅蛋白含量的測定是在被稀釋的血液中加入溶血劑后,使紅細胞釋放出血紅蛋白,后者與溶血劑結合形成血紅蛋白衍生物,進入血紅蛋白測試系統(tǒng),在特定波長(一般在530-550nm)下比色,吸光度的變化與液體中Hb含量成比例,儀器便可顯示Hb濃度.不同系列的血液分析儀配套溶血劑配方不同,形成的血紅蛋白衍生物也不同,但大多數(shù)的最大吸收光譜接近540nm.近年來許多高檔的分析儀上采用了激光散射法進行單個血紅細胞血紅蛋白的分析,以盡量減少高WBC,乳糜血,高膽紅素等對HBG比色的影響.

二、血紅細胞及血小板的檢測

        血紅細胞的檢測是血液分析儀的重要組成部分,紅細胞的檢測以往主要還是使用阻抗法對紅細胞的數(shù)目和體積計數(shù),以此分選出不同大小的信號并打印出紅細胞體積分布直方圖.但現(xiàn)在也采用光學和電阻抗法結合的處理方法對紅細胞體積進行三維空間分析(3D)以期得到更正確的結果.如拜爾的ADVIA 120以光散射法檢測紅細胞,以低角度前向光散射和高角度散射兩個測量系統(tǒng)同時測量1個紅細胞,根據(jù)低角度光轉換能量的大小測量單個紅細胞體積與總數(shù);根據(jù)高角度的光散射得出單個血紅蛋白濃度,可準確得出MCV(平均紅細胞體積),MCH(平均血紅蛋白含量),MCHC(平均血紅蛋白濃度)測定值,并繪出紅細胞散射圖,單個紅細胞體積及紅細胞內(nèi)Hb含量的直方圖及求出RWD(紅細胞體積分布寬度),HDW(紅細胞血紅蛋白分布寬度)等參數(shù).

        由于血小板和紅細胞體積的明顯差異,很容易用一個限定閾值將兩者同時測得的光電信號區(qū)分.因此,迄今為止全血分析中血小板,紅細胞檢查均采用一個共用的分析系統(tǒng).但由于血小板和紅細胞測量信號常有交叉,如大血小板的脈沖信號可能被誤認為紅細胞而計數(shù),小紅細胞的脈沖信號可能進入血小板通道,造成實驗誤差.各血細胞分析儀生產(chǎn)廠家采用多種先進技術以減少血小板計數(shù)的干擾,以下我們就分別給予介紹:

        掃流技術(sweep flow):由于血小板和紅細胞在同一個計數(shù)池中計數(shù),紅細胞體積較大,在通過正中計數(shù)感應區(qū)時會形成一個大脈沖,若有回流會同時又產(chǎn)生一個因渦流再度進入感應區(qū)邊緣而形成的小脈沖使電極可能感應到相當于血小板大小的小脈沖,使血小板計數(shù)假性增多.掃流技術是在進行紅細胞和血小板計數(shù)的同時,在紅細胞計數(shù)小孔的后面有一個穩(wěn)定的液流通過,這樣可以使后的紅細胞被立即沖走,以防止回到感應區(qū)被計數(shù)為血小板.