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如何選擇酶標儀的測定波長
加入時間：2014-03-27 11:17:49 當前新聞點擊率：11268
酶標儀的標準配置包括405nm,450nm,490nm及630nm四塊濾光片，具有紫外功能的酶標儀還配備有340nm。
目前用于酶聯免疫吸附測定,最常使用的標記用酶是辣根過氧化物酶(HRP)，對應的底物通常為四甲基聯苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)。底物在過氧化氫溶液的存在下，經辣根過氧化物酶作用，分別氧化為2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和聯苯醌。
鄰苯二胺(OPD)的氧化產物DAB, 在pH值為5．0左右時，在450nm波長處有最大吸收，此時可用450nm的濾光片測定吸光值。當加入強酸作為終止試劑終止反應時，pH值降到接近0，此時最大吸收波長移至492 nm，此時可用492nm的濾光片測定吸光值。
四甲基聯苯胺(TMB)的氧化產物聯苯醌，一般在波長為450nm處有最大消光系數。使用硫酸作為終止劑可使產物穩定90min，便于檢測。
 （普朗醫療品牌產品——酶標分析儀9606）
因此，450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定最常用的。有的酶標儀以490nm濾光片替代492nm濾光片，影響不大。
除了這兩個基本濾光片外，考慮到雙波長比色的需要，還應有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片，雙波長比色主要用于消除非特異干擾的影響。
如果一般醫院或是醫療器械單位實驗室需要用酶標儀作微量生化測定，就需要擴展紫外檢測功能，此時需要一個340 nm波長濾光片。
總之，以上介紹的是常用的幾個波長的濾光片，用戶還可以根據自己的需求選擇其他波長的濾光片。一般各種酶標儀都配有放置濾光片的可自動轉換的部件，可以同時安裝6～8片濾光片，可以滿足用戶的不同需求。 上一篇:
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