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              避免全自動生化分析儀試劑交叉污染方法
              加入時間:2012-01-09 09:48:10  當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:17984

                 多家醫(yī)療器械公司生產(chǎn)的不同類型的全自動生化分析儀因其清洗系統(tǒng)的工作模式所致,一個項(xiàng)目對緊隨其后的幾個項(xiàng)目的測定會帶來一定程度的污染,并且隨著使用時間的加,試劑交叉污染的程度會有所加劇。在實(shí)際工作中主要表現(xiàn)為某一項(xiàng)目的測定結(jié)果一直符合臨床要求,可是一段時間以后測定結(jié)果趨高,并且日益明顯;而單獨(dú)測定該項(xiàng)目時測值又合理起來,給日常工作帶來極大的不便。因此避免試劑間的干擾,變的尤為嚴(yán)肅。試劑間的干擾有兩個的原因:一是試劑中含有下一個測試所要測定的底物,或是含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測定的底物有作用,因而直接干擾下一反應(yīng)的測定結(jié)果;另一個則是該試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對下一個項(xiàng)目的反應(yīng)進(jìn)程帶來了間接的干擾,因?yàn)樵谟性噭┪廴镜那闆r下,下一項(xiàng)目所測定的是前后兩個項(xiàng)目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。下面通過對試劑成分的分析和相應(yīng)試驗(yàn)來找出試劑交叉污染可能帶來的情況,進(jìn)而指導(dǎo)相應(yīng)的項(xiàng)目調(diào)整和結(jié)果分析。

              1、試劑間可能發(fā)生的干擾情況

                     1-1  ALTIFCC)、ASTIFCC)試劑中含有高活力LD成分,有可能會對LD的測定帶來干擾。

                     1-2  ALPIFCC)、CKNAC-activated)、CK-MBNAC-activated)、CO2PEPC)、α-Amy(EPS)等試劑中使用磷酸緩沖液,可能會對其后的Mg2+ 測定帶來干擾。

                     1-3  ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、α-HBDH(DGKC)等試劑使用磷酸緩沖液,可能會對無機(jī)磷的測定帶來干擾。

                     1-4  CKNAC-activated)、CK-MBNAC-activated)試劑中含有Glu成分,其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反應(yīng)過程,因此可能對Glu測定帶來干擾,尤其對GluHK法測定可能帶來嚴(yán)重干擾。   

                     1-5  Mg2+試劑 (Calmagite)中含有EGTA成分,為Ca2+絡(luò)合劑,可能對Ca2+的測定帶來干擾。   

                     1-6  個別試劑以甘油做酶的保護(hù)劑,因此可能對TG的測定帶來干擾,等等。

                     2、干擾的排查和發(fā)現(xiàn)  

                     事實(shí)上各個公司所提供的產(chǎn)品說明書常不能夠全面反映試劑組成的情況,因此通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)試劑交叉污染可能帶來的干擾變得相當(dāng)重要。下面以兩個試驗(yàn)來加以說明。   

                     2-1  將某一試劑作為樣本進(jìn)行全套項(xiàng)目測定,考察結(jié)果的情況,進(jìn)而確定發(fā)生試劑交叉污染時造成直接干擾的項(xiàng)目。   

                     2-2  1份樣本分為兩份,一份加生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)南♂屢?,另一份加等量的試劑,同時測定、考察結(jié)果的變化,進(jìn)而確定可能發(fā)生試劑交叉污染時造成干擾的項(xiàng)目。進(jìn)行這一實(shí)驗(yàn)時,使用半自動生化分析儀可能會得到更為理想的結(jié)果,尤其是針對雙試劑反應(yīng)時,R1、R2加入時機(jī)可以得到更為精確的控制。   

                     此外,由于試劑成分的復(fù)雜多樣性,實(shí)時儀器狀況的獨(dú)特性,可能發(fā)生的試劑間的交叉污染的情況不盡相同。

                     3、干擾的避免

                     試劑間的嚴(yán)重干擾會極大的影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性,因此隔絕二者間的聯(lián)系非常必要。一般在安排項(xiàng)目順序時要求兩個項(xiàng)目間至少要有一個非干擾項(xiàng)目,而最徹底的做法則是將被干擾項(xiàng)目置于干擾項(xiàng)目之前,以消除干擾發(fā)生的可能。同時要求檢驗(yàn)人員對儀器的工作狀態(tài)要了如指掌,并在一個樣本的項(xiàng)目選擇或一個樣本的最后一項(xiàng)與下一樣本的第一個項(xiàng)目選擇時對于試劑交叉污染的可能性加以考慮,合理安排項(xiàng)目順序,以便得到更為合理的結(jié)果。

                     通常情況下可以按照以下順序安排項(xiàng)目:ALTAST、 ALP、γ–GTChE、TP、 Alb、TBIL、 DBIL、Urea、UA、Cr、CKCK-MBα–HBDH 、LD、 Glu TG TC、 HDL-C、 LDL-C、αpoAI、αpoB、 α–Amy 、CO2、P3-、  Fe3+   Ca2+、Mg2+。  

                     實(shí)際工作中,用全自動生化分析儀進(jìn)行連續(xù)的多個項(xiàng)目的測定,每個反應(yīng)的詳細(xì)過程難以探知,因此理論分析結(jié)合實(shí)際應(yīng)用可以摸索出一套符合本單位工作的方法。

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