五分類血細胞分析儀和三分群血細胞分析儀相比，由于增加了對嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞的常規(guī)檢測，更能滿足臨床需要，因此在各級醫(yī)院檢驗科的應(yīng)用越來越廣泛，為幫助醫(yī)院能選擇一臺適合自己醫(yī)院的五分類血細胞分析儀，現(xiàn)對五分類血細胞分析儀的白細胞分類原理和代表型號做扼要分析。

    1 電阻抗、高頻電導(dǎo)及激光散射聯(lián)合檢測法即庫爾特公司的VCS技術(shù)．V：代表醫(yī)療設(shè)備體積容量(volume)也就是庫爾特首創(chuàng)發(fā)明的電阻抗原理．把電阻法微孔技術(shù)應(yīng)用于計數(shù)血細胞和測定其體積的大小。C：代表傳導(dǎo)性即電導(dǎo)(conductivity)．指一束電磁波或稱射頻．穿透細胞的傳導(dǎo)性，它取決于細胞的大小和內(nèi)部結(jié)構(gòu)；經(jīng)校正后的傳導(dǎo)性叫opacity即“不透明性”．這時不再反映細胞大小．而是反映細胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)．像核的大小，核漿比例和密度等。S：代表散射(scatter)．指在不同角度測得的散射光強度。由于各類細胞的表面結(jié)構(gòu)不同和顆粒大小不同而對光的散射各異，進而區(qū)分各類細胞。庫爾特公司設(shè)計在單一通道上同時用這三種方法對同一白細胞進行丈量，避免了有些血液分析儀要設(shè)計好幾個通道或加染色試劑的麻煩。儀用具體的運作是：根據(jù)流體力學(xué)的原理，應(yīng)用鞘流技術(shù)使溶血后剩余的白細胞和網(wǎng)織紅細胞單個通過檢測器，接受VCS三種技術(shù)的同時檢測，完成白細胞分類過程。VCS技術(shù)在Coulter公司的STKS型、MAXM 型以及Gen．s型五分類血液分析儀上均已成功的應(yīng)用。而且MAXM 型和Gen．s型可計數(shù)網(wǎng)織紅細胞，Gel1．S型可選配自動制血片機。以上幾種型號還可直接計數(shù)CD和CD。淋巴細胞，并算出其比率。

    2 光散射和細胞化學(xué)染色聯(lián)合檢測法
即利用激光散射和過氧化物酶染色技術(shù)進行細胞分類。利用光散射的原理計數(shù)血細胞，因細胞表面結(jié)構(gòu)不同，在不同角度上散射光有差別，有助于對白細胞的區(qū)分。白細胞化學(xué)染色即是在稀釋液中加進過氧化酶(MPO)的底物及現(xiàn)色劑，根據(jù)白細胞對MP0的反應(yīng)分類。中性細胞MP0 為強陽性，嗜酸性細胞陽性更強，單核細胞為弱陽性，淋巴細胞性，嗜堿性細胞亦為陰性，故綜合光散射和細胞化學(xué)染色的特點，在電腦顯示屏上可得到類似流式細胞儀的二維或三維圖像逐一不同顏色的散點圖．并可打出分類結(jié)果。由于嗜堿性細胞不含此酶，不能被檢測．因此一些儀器專門設(shè)置了嗜堿性細胞檢測系統(tǒng)．它的丈量通道采用時間差的方法，與RBC／PLT的丈量系統(tǒng)共用一個通道。在激光技術(shù)中目前有半導(dǎo)體激光和氣體激光。半導(dǎo)體激光功率弱，但作為細胞分類自己足夠；氣體激光功率強 二者比較半導(dǎo)體激光具有壽命長(7～1O年)體積小，啟動快．耗電小，對穩(wěn)壓要求低，更為’經(jīng)濟適用等特點。Bayer公司的的ADVIA 120型和2120型血細胞分析儀是用光散射原理進行血細胞分析的代表。Sysmex公司的SF-3000型血細胞分析儀也用此原理進行工作。

    3 電阻抗和射頻電導(dǎo)聯(lián)合檢測法
這種方法是分別采用四個檢測系統(tǒng)來檢測不同類型的細胞① 淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞檢測系統(tǒng)：在細胞懸浮淮中加進溶血劑使紅細胞溶解，而使白細胞保持完整，細胞漿及核形態(tài)近似于生理狀態(tài)，當(dāng)這些細胞通過檢測系統(tǒng)時，對白細胞進行電阻抗法(丈量細胞體積)和射頻電導(dǎo)法(檢測細胞核和顆粒密度)的聯(lián)合檢測，結(jié)果將細胞分成淋巴細胞、單核細和中性粒細胞三個群體。② 嗜酸性細胞和嗜堿性細胞兩種檢測系統(tǒng)：在細胞懸浮液中加進特殊的溶血劑，除嗜酸性細胞和嗜堿性細胞外，其他細胞均被溶解或萎縮．再對保持完整的嗜酸性細胞或嗜堿性細胞進行計數(shù)。③幼稚細胞檢測系統(tǒng)：在細胞懸浮液中加進硫化氨基酸，由于占位不同，結(jié)合在幼稚細胞的氨基酸比成熟細胞多．且對溶血劑有抵抗作用，當(dāng)加進溶血劑時．成熟細胞被溶解，只保存著可能存在的幼稚細胞用來計數(shù)。Sysmex公司的SE一9000血細胞分析儀就是采用這種方法進行五分類的。該儀器可顯示及打印四個直方圖、兩個散點圖．一個報告表以及FLAG信息等。但該儀器配套的Labman中文軟件卻無法打印散點圖。SE一9000血細胞分析儀有監(jiān)測造血干細胞的功能。SE一9000血細胞分析儀和該公司研制的SP100自動制片染色機以及R3000／2000網(wǎng)織紅細胞計數(shù)儀組合起來，加上一個電腦工作站．構(gòu)成一套該公司稱為HST的系列，即可形玉成部血細胞分析自動化系統(tǒng)。

    4 多角度激光偏振光散射檢測法
采用這種技術(shù)的儀器使用鞘流液將標(biāo)本血稀釋，稀釋后白細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài)，只有嗜堿性細胞由于其吸濕的特性而使細胞結(jié)構(gòu)有稍微改變。紅細胞內(nèi)的血紅蛋白在高滲透壓的作用下．從細胞中分離出來。而鞘流的水分則進進紅細胞內(nèi)．使細胞膜結(jié)構(gòu)仍然完整，它與鞘流的折光系數(shù)相同，不影響白細胞的檢測。儀器同時從四個角度來檢測通過激光束的細胞所產(chǎn)生的散射光，由于細胞大小、折射指數(shù)、核形、核漿比率以及顆粒性質(zhì)等，均可影響在不同角度測得的散射光量。O。前角散射光用來測定細胞的體積，1O。狹角散射光用來測定細胞結(jié)構(gòu)．9O。垂直散射光對細胞內(nèi)部顆粒及細胞質(zhì)進行丈量，9O。消偏振光散射將嗜酸性細胞從中性粒細胞和其它細胞中分離出來。