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              如何通過全自動血液細(xì)胞分析儀對紅細(xì)胞異常進(jìn)行檢查
              加入時間:2012-02-01 10:55:15  當(dāng)前新聞點擊率:5353

                  普朗醫(yī)療器械公司資訊 紅細(xì)胞是人體血液組成中的重要血液細(xì)胞。那么如果紅細(xì)胞發(fā)生異常,將導(dǎo)致人體一些疾病的產(chǎn)生。那么,我們該如何通過全自動血液細(xì)胞分析儀對血液紅細(xì)胞的異常狀況進(jìn)行檢查呢? 

                  ①紅細(xì)胞鹽水滲透脆性試驗。原理:懸浮于等滲鹽水中的紅細(xì)胞形態(tài)不變,懸浮于低滲鹽水中的紅細(xì)胞則發(fā)生膨脹,直至破裂、溶血。用不同濃度的低滲鹽水來觀察紅細(xì)胞膜的最小抵抗力(開始溶血)和最大抵抗力(完全溶血)。抵抗力增強者稱脆性減低,反之,稱脆性增加。
                正常值:開始溶血:0.42~0.46%氯化鈉溶液;完全溶血:0.32~0.34%氯化鈉溶液。
                臨床意義:本試驗用于測定紅細(xì)胞膜有無異常。滲透脆性增加見于遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。

               ?、诩t細(xì)胞機(jī)械脆性試驗。原理:紅細(xì)胞在體外由于機(jī)械性損傷可發(fā)生溶血。將抗凝血置震蕩器上按一定頻率和時間震動后測紅細(xì)胞溶血的百分率。
                正常值:7.5~23.9%。
                臨床意義:遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥的病人,此試驗的溶血百分率均可有不同程度的增高。尤其輕癥遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥的病人,此試驗比紅細(xì)胞鹽水滲透脆性試驗更敏感,有助于診斷。

               ?、鬯峄视腿芙庠囼灒ˋGLT)。原理:在20~28℃時,正常紅細(xì)胞加入酸化甘油后會緩慢溶血而出現(xiàn)光密度下降。當(dāng)光密度下降為起始光密度一半時所需時間,稱AGLT50。遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥病人紅細(xì)胞的AGLT50較正??s短。 
                正常值:AGLT50>30分鐘。
                臨床意義:此試驗對遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥的診斷敏感性極高。而其他溶血性疾病無假陽性結(jié)果,利于鑒別診斷。

               ?、茏陨砣苎囼炁c糾正試驗。原理:以無菌的脫纖維血液,于37℃溫育24~48小時,觀察其自然溶血程度(百分率),并加入葡萄糖及 ATP后觀察其溶血程度有無減輕稱為糾正試驗。
                正常值:0.9%氯化鈉 10%葡萄糖24小時<0.5%?。?.4% 48小時<3.5%?。?.6%
                臨床意義:通過血液分析儀研究發(fā)現(xiàn)正常人紅細(xì)胞經(jīng)溫育24小時后,不溶血或極輕微溶血。48小時后僅小量溶血。加入葡萄糖后溫育,溶血明顯減慢。由于細(xì)胞膜的缺陷所致遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥病人,自身溶血發(fā)生快且明顯。因酶的缺陷所致的先天性非球形紅細(xì)胞溶血性貧血病人,自身溶血也常增強,而其中Ⅰ型病人,若在實驗中加入葡萄糖或ATP,則溶血明顯減輕,見于葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)缺乏;其Ⅱ型病人,在試驗中加入ATP可使溶血明顯減輕,若加葡萄糖則無效,見于丙酮酸激酶缺乏。可以鑒別不同病因所致的先天性非球形紅細(xì)胞溶血性貧血。

               ?、菟崛苎囼灐T恚赫H思t細(xì)胞在自身新鮮血中、弱酸(pH6.6~6.8)條件下,孵育1小時,不發(fā)生溶血。而陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿的病人,因紅細(xì)胞本身結(jié)構(gòu)異常和紅細(xì)胞外因素的影響呈現(xiàn)酸溶血現(xiàn)象。
                正常值:陰性。
                臨床意義:本試驗陽性見于陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿病人。

               ?、拚崽牵ㄌ撬┤苎囼?。原理:陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿病人的紅細(xì)胞膜有缺陷,當(dāng)病人的血液懸浮于等滲的10%蔗糖溶液中時,即發(fā)生滲誘溶血現(xiàn)象。
                正常值:正常人不發(fā)生溶血。
                臨床意義:幾乎所有陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿病人均可呈陽性反應(yīng),故此試驗比酸溶血試驗敏感。但也可在一些其他類型貧血病人呈弱陽性反應(yīng)。 ⑦紅細(xì)胞葡萄糖 -6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)活性測定。原理:G-6-PD在催化6-磷酸葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸葡萄糖酸過程中,使氧化型輔酶Ⅱ(NADP)還原生成還原型輔酶Ⅱ(NADPH)。還原型輔酶Ⅱ在波長340nm處有一吸收峰,故可通過單位時間生成還原型輔酶Ⅱ的量來測定G-6-PD活性。
                正常值:4.97±1.43μmNADPH/分鐘/克血紅蛋白。
                臨床意義:用于確診G-6-PD的缺乏,因G-6-PD缺乏可致NADPH在單位時間內(nèi)生成減少。

                ⑧高鐵血紅蛋白還原試驗。原理:高鐵血紅蛋白須依靠還原型輔酶Ⅱ (NADPH)供氫而還原成還原血紅蛋白。在G-6-PD缺乏時,因NADPH生成減少,故高鐵血紅蛋白的還原少于正常。
                正常值:>75%。
                臨床意義:G-6-PD缺乏時,高鐵血紅蛋白還原率一般低于30%。此法簡單易行,適用于過篩檢查,但可有假陽性反應(yīng)。

               ?、嶙冃灾榈鞍仔◇w檢查。原理:在抗凝血中加入氧化劑乙酰苯肼,經(jīng)37℃孵育后再用甲紫作活體染色,在G-6-PD缺乏的紅細(xì)胞內(nèi)可出現(xiàn)藍(lán)色變性珠蛋白小體。 正常值:含5個以上變性珠蛋白小體的紅細(xì)胞占0~28%。在G-6-PD缺乏者平均可達(dá)67.8%(45~92%)。
                臨床意義:作為檢查G-6-PD缺乏的過篩試驗。但缺乏特異性,也可見于不穩(wěn)定血紅蛋白病的紅細(xì)胞。

                ⑩血紅蛋白電泳。原理:大部分異常血紅蛋白的等電點不同,所以在使用不同緩沖液的電泳中的泳動速度不同,而形成各種不同的區(qū)帶。故可由電泳圖形鑒別各類異常血紅蛋白的性質(zhì)及其含量。
                臨床意義:此檢查為診斷地中海貧血及大多數(shù)異常血紅蛋白(Hbs、Hbc、HbD、HbH)的可靠方法。
              ?、箟A血紅蛋白(HbF)測定。原理:血紅蛋白A置于堿性溶液中即發(fā)生變性沉淀,且不能通過濾紙。血紅蛋白F對堿有較強的耐力,故用堿變性試驗可測定。
                正常值:成人血液中血紅蛋白F的含量不超過2%。
                臨床意義:β珠蛋白生成障礙性貧血時,HbF顯著增多,達(dá)10%以上。在急性白血病和再生障礙性貧血的病人也可輕度增多。
              ?、t蛋白H包涵體生成試驗。原理:血紅蛋白H在體外極易變性和沉淀。使用煌焦油藍(lán)染色,于37℃保溫15分鐘,能使血紅蛋白 H在細(xì)胞中形成大小不等,數(shù)量不一,分布不均的深藍(lán)色包涵體。
                正常值:陰性。
                臨床意義:此試驗陽性可診斷血紅蛋白H病。不穩(wěn)定血紅蛋白亦可呈陽性結(jié)果,但須保溫24小時。
              ?、t蛋白c試驗。原理:血紅蛋白c病的紅細(xì)胞中可見棒狀或六角形結(jié)晶。當(dāng)細(xì)胞置于3%氯化鈉液中,于37℃溫育1小時后,帶有Hbc的紅細(xì)胞內(nèi)結(jié)晶體更易顯出。
                臨床意義:此試驗可協(xié)助診斷血紅蛋白c病。
              ?、t細(xì)胞鐮變試驗。含有血紅蛋白 s的紅細(xì)胞在缺氧的情況下,易發(fā)生鐮形變化。用于確診血紅蛋白s病。
              ?、惐荚囼灐UQt蛋白加入異丙醇孵育于37℃40分鐘后方出現(xiàn)沉淀,而不穩(wěn)定血紅蛋白孵育5分鐘即可出現(xiàn)沉淀。用于診斷不穩(wěn)定血紅蛋白,其診斷價值高于變性珠蛋白小體檢查。
                免疫性溶血性疾病的抗體檢查 包括以下檢查:
               
               ?、倏谷饲虻鞍自囼?。此試驗系檢查不完全抗體的一種敏感的方法。完全性抗體被紅細(xì)胞吸附后與抗原相遇,在生理鹽水中可發(fā)生凝集反應(yīng)。而不完全抗體不能與含有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞發(fā)生凝集。不完全抗體致敏的紅細(xì)胞表面,吸附有一層不完全抗體(屬于免疫球蛋白IgG),當(dāng)加入抗人球蛋白的血清后,使致敏紅細(xì)胞發(fā)生凝集,顯示出不完全抗體的存在。抗人球蛋白測定分直接法與間接法。直接法系檢查紅細(xì)胞是否吸附有不完全性抗體,間接法系檢查血清中有否不完全性抗體。
                正常值:陰性。
                臨床意義:抗人球蛋白試驗呈陽性反應(yīng)者,見于新生兒溶血病、自身免疫性溶血性貧血、溶血性輸血反應(yīng)等。

               ?、诶淠卦囼?。原理:許多人體內(nèi)含有低效價的冷凝集素(屬 IgM抗體)。在冷凝集素病患者的血清中,其效價明顯增高。冷凝集素是一種可逆性抗體,在低溫時可與自身紅細(xì)胞或“O”型紅細(xì)胞發(fā)生凝集,當(dāng)溫度增高時,凝集塊又復(fù)消失。
                正常值:效價為1:8~16。
                臨床意義:陽性結(jié)果用于診斷冷凝集素病。但有些冷抗體型自身免疫性溶血性疾病亦可呈陽性結(jié)果。
               
               ?、劾洌瓱崛苎囼?。陣發(fā)性冷性血紅蛋白尿癥患者的血清中有一種依賴補體的自身雙相溶血素(屬IgG),在0~4℃時,此溶血素與紅細(xì)胞結(jié)合,并吸附補體,但不溶血。若升溫至30~37℃即發(fā)生溶血。
                正常值:陰性。
                臨床意義:用于確診陣發(fā)性冷性血紅蛋白尿癥。

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