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        全波段酶標(biāo)儀采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的基本原理
        加入時(shí)間:2016-08-22 10:12:27  當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:2936

        近年來,國內(nèi)食品安全問題頻出,從“瘦肉精事件”到“三氯氰胺事件”、“蘇丹紅事件”再“塑化劑事件”等等。這些事件的發(fā)生使得酶標(biāo)儀開始走進(jìn)人們的視野,不少地區(qū)的菜場(chǎng)都開始陸續(xù)配備此款醫(yī)療器械,常用為全波段酶標(biāo)儀。那么全波段酶標(biāo)儀采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的基本原理是什么呢?

        全波段酶標(biāo)儀采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的基本原理如下:

        將過量特異抗體(或抗原)事先包被于載體(酶標(biāo)板)上,通過抗原抗體反應(yīng)使待側(cè)物質(zhì)(抗原或抗體)和酶標(biāo)記物(用HRP-辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體或抗原)也結(jié)合在載體上(固相分離),經(jīng)洗滌去除游離的酶標(biāo)記物后,加入底物,已經(jīng)結(jié)合在載體上的標(biāo)記酶促使底物顯色。利用光電比色法,對(duì)待測(cè)物進(jìn)行定性判斷或定量測(cè)定。

        此法檢驗(yàn)靈敏度可以達(dá)到ng/ml水平。臨床樣本是血清。

        包被酶標(biāo)板:將特異抗原溶液加入酶標(biāo)板孔內(nèi),4℃過夜。然后用洗滌液洗滌3-5次(手洗或洗板機(jī)進(jìn)行洗板),這樣溶液中的特異抗原被牢固吸附在酶標(biāo)板的微孔表面,形成固相抗原,殘液及雜質(zhì)被清洗掉。

        全波段酶標(biāo)儀

        (普朗醫(yī)療品牌---DNM-9602系列酶標(biāo)分析儀

        加患者樣本液(病人血清),樣本液中如果含有待測(cè)抗體,經(jīng)過溫育反應(yīng),則與已包被的抗原產(chǎn)生特異結(jié)合,生成包被抗原與待測(cè)抗體的復(fù)合物,被吸附在酶標(biāo)板的微孔表面。然后再次進(jìn)行洗滌,去除殘液及干擾物質(zhì)。

        加酶結(jié)合物(特異抗原與酶的結(jié)合物),經(jīng)過溫育反應(yīng),生成包被抗原+待測(cè)抗體+酶標(biāo)抗原的三者復(fù)合物,同樣被吸附在微孔表面,然后再次洗滌,去除游離的或非特異沾附的酶結(jié)合物(洗板)。

        加顯色液(底物液,國內(nèi)常用OPD、TMB兩種顯色底物液,檢驗(yàn)波長分別為492nm和450nm),約經(jīng)過10-20分鐘顯色反應(yīng),被吸附的復(fù)合物中的酶與顯色底物液生成有色溶液。此時(shí),由于游離或非特異吸附的酶已被清除,所以溶液顏色的深淺,僅決定于已與待測(cè)物結(jié)合的酶的量,因此能真實(shí)反映待測(cè)物的濃度。被固化的酶越多,顯色越深,說明待測(cè)物濃度越大。

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