酶聯免疫檢測儀即酶標儀，是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器，屬于生命科學儀器的一類。目前，酶聯免疫檢測儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中，特別在近幾年中，由于大量的酶聯免疫試劑盒的應用，使得酶聯免疫檢測儀在生殖保健領域中應用越來越廣泛，同時促進了生殖健康技術水平提高。

那么，實驗室如何選擇酶聯免疫檢測儀的測定波長？

一般酶聯免疫檢測儀的測定波長在400～750nm或800nm之間，完全可以滿足ELISA的顯色測定。目前國內常見的ELISA試劑盒所使用的標記用酶均為辣根過氧化物酶(HRP)，底物通常為四甲基聯苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)，其在過氧化氫溶液的存在下，經HRP作用，分別氧化為2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和聯苯醌。當pH值為5．0左右時，DAB在450nm波長處有吸收，當pH值降為L 0時，吸收波長移至492 nm，同時摩爾消光系數變大，顯色加深，因而常用強酸如硫酸或鹽酸終止反應。TMB的氧化產物聯苯醌在波長450nm處有消光系數，如果HRP量少，H：O：和TMB過量時，則形成藍色的陽離子根。

降低pH，即可使藍色的陽離子根轉變為黃色的聯苯醌，使用硫酸作為終止劑可使產物穩定90min。因此，450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定常用的。各種酶聯免疫檢測儀都配有放置濾光片的可自動轉換的部件，可以同時安裝6～8片濾光片，所配備的濾光片均應包括上述兩個波長，有的酶聯免疫檢測儀以490nm濾光片替代492nm濾光片，影響不大。

除了這兩個基本濾光片外，考慮到雙波長比色的需要，還應有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片，其他濾光片可根據自己的需要選擇。有時，有的實驗室希望用酶聯免疫檢測儀作微量生化測定，故酶聯免疫檢測儀生產廠家對其生產的酶聯免疫檢測儀擴展了紫外檢測功能，此時需要一個340 nm波長濾光片。此時，酶聯免疫檢測儀的測定波長范圍就成為340—750nm或800nm。

酶聯免疫檢測儀有單波長和雙波長檢測功能。有時使用者不知在什么情況下使用單或雙波長檢測。所謂的“單波長”就是使用一種對顯色吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定；而“雙波長”則除了用對顯色吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定外，同時用對特異顯色不敏感的波長如630 nm進行測定，酶聯免疫檢測儀打印出來的吸光度則為二者之差。630 nm波長下得到的吸光度是非特異的，來自于板孔上諸如指紋、灰塵、臟物等所致的吸收。因此，在ELISA比色測定中，使用雙波長，且不必設空白孔。