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化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀原理介紹
化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀原理介紹
加入時(shí)間：2012-08-29 08:54:44 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率：5894
酶標(biāo)儀的化學(xué)發(fā)光是物質(zhì)在進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中伴隨的一種光輻射現(xiàn)象，可以分為直接發(fā)光和間接發(fā)光。直接發(fā)光是最簡(jiǎn)單的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，有兩個(gè)關(guān)鍵步驟組成：即激發(fā)和輻射。如A、B兩種物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)生成C物質(zhì)，反應(yīng)釋放的能量被C物質(zhì)的分子吸收并躍遷至激發(fā)態(tài)C*，處于激發(fā)的C*在回到基態(tài)的過(guò)程中產(chǎn)生光輻射。這里C*是發(fā)光體，此過(guò)程中由于C直接參與反應(yīng)，故稱直接化學(xué)發(fā)光。
酶標(biāo)儀的醫(yī)療設(shè)備間接發(fā)光又稱能量轉(zhuǎn)移化學(xué)發(fā)光，它主要由三個(gè)步驟組成：首先反應(yīng)物A和B反應(yīng)生成激發(fā)態(tài)中間體C*(能量給予體)；當(dāng)C*分解時(shí)釋放出能量轉(zhuǎn)移給F(能量接受體)，使F被激發(fā)而躍遷至激發(fā)態(tài)F*；最后，當(dāng)F*躍遷回基態(tài)時(shí)，產(chǎn)生發(fā)光。
一個(gè)酶標(biāo)儀化學(xué)反應(yīng)要產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象, 必須滿足以下條件：
第一是該反應(yīng)必須提供足夠的激發(fā)能, 并由某一步驟單獨(dú)提供，因?yàn)榍耙徊椒磻?yīng)釋放的能量將因振動(dòng)弛豫消失在溶液中而不能發(fā)光；
第二是要有有利的反應(yīng)過(guò)程, 使化學(xué)反應(yīng)的能量至少能被一種物質(zhì)所接受并生成激發(fā)態(tài)；
第三是激發(fā)態(tài)分子必須具有一定的化學(xué)發(fā)光量子效率釋放出光子，或者能夠轉(zhuǎn)移它的能量給另一個(gè)分子使之進(jìn)入激發(fā)態(tài)并釋放出光子。
酶標(biāo)儀化學(xué)發(fā)光分析測(cè)定的物質(zhì)可以分為三類：
第一類物質(zhì)是化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中的反應(yīng)物；
第二類物質(zhì)是化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中的催化劑、增敏劑或抑制劑；
第三類物質(zhì)是偶合反應(yīng)中的反應(yīng)物、催化劑、增敏劑等。
這三類物質(zhì)還可以通過(guò)標(biāo)記方式用來(lái)測(cè)定其他物質(zhì)，進(jìn)一步擴(kuò)大化學(xué)發(fā)光分析的應(yīng)用范圍。
酶標(biāo)儀化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的發(fā)光類型通常分為閃光型（flash type）和輝光型（glow type）兩種。閃光型發(fā)光時(shí)間很短，只有零點(diǎn)幾秒到幾秒。輝光型又稱持續(xù)型，發(fā)光時(shí)間從幾分鐘到幾十分鐘，或幾小時(shí)至更久。閃光型的樣品必須立即測(cè)量，必須配以全自動(dòng)化的加樣及測(cè)量酶標(biāo)儀。輝光型樣品的測(cè)量可以使用通用型儀器，也可以配有全自動(dòng)化儀器。 |
