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熒光酶標儀與光吸收酶標儀原理的區(qū)別在哪里呢？
熒光酶標儀與光吸收酶標儀原理的區(qū)別在哪里呢？
加入時間：2012-08-30 08:52:35 當前新聞點擊率：6949
酶標儀是構成酶免檢驗工作站的其中一種醫(yī)療器械，還有一個比較重要的設備是洗板機，酶標儀有熒光酶標儀和光吸收酶標儀之分，那么熒光酶標儀原理與光吸收酶標儀原理有什么區(qū)別呢？具體內容如下所示：
熒光酶標儀原理
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后，此光即為熒光物質的激發(fā)光，被測的熒光物質在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光，經(jīng)過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上，由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過放大器放大輸至記錄儀，激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動機帶動的凸輪所控制，當測繪熒光發(fā)射光譜時，將激發(fā)光單色器的光柵，固定在最適當?shù)募ぐl(fā)光波長處，而讓熒光單色器凸輪轉動，將各波長的熒光強度訊號輸出至記錄儀上，所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
當測繪熒光激發(fā)光譜時，將熒光單色器的光柵固定在最適當?shù)臒晒獠ㄩL處，只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉動，將各波長的激發(fā)光的強度訊號輸出至記錄儀，所記錄的光譜即激發(fā)。
當進行樣品溶液的定量分析時，將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長處，將熒光單色器調節(jié)至所選擇的熒光波長處，由記錄儀得出的信號是樣品溶液的熒光強度。
光吸收酶標儀原理
光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光， 400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大于780nm稱為紅外光。光吸收酶標儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物吸光值。
光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系。
檢測單位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度，OD＝1og（1／trans），其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強度成下述關系：E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度，Ι0 為在檢測物之前的光強度，Ι為從被檢測物出來的光強度。
OD值由下述公式計算：
E＝OD=C×D×E
C為檢測物的濃度
D為檢測物的厚度
E為摩爾因子
在特定波長下測定每一種物質都有其特定的波長，在此波長下，此物質能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結果的不準確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進行檢測，稱為測量波長。
但是每一種物質對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。酶標儀檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
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