在血液分析儀出現(xiàn)前期，血細(xì)胞檢查完全采用手工方法,這樣就造成了操作的繁瑣費(fèi)時(shí),并且由于諸多原因,檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性和精密度難以保證。隨著科技發(fā)展社會(huì)進(jìn)步，1958 年,庫(kù)爾特采用電阻率變化與電子技術(shù)相結(jié)合的方法,發(fā)明創(chuàng)造了性能比較穩(wěn)定的電阻抗法血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,開(kāi)創(chuàng)了血液分析儀的新紀(jì)元。在之后的時(shí)間里，隨著各種高新技術(shù)和人員在血液分析儀中的應(yīng)用和研發(fā),使其檢測(cè)原理不斷完善更新,檢測(cè)水平不斷提高,測(cè)量參數(shù)不斷增加,各種類(lèi)型的血液分析儀已在國(guó)內(nèi)外各醫(yī)院廣泛使用。但從根本上講,其檢測(cè)原理大致分為兩部分,即電阻抗法與光散射法。
       電阻抗法白細(xì)胞計(jì)數(shù)原理是根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì),以對(duì)電解質(zhì)溶液中懸浮顆粒在通過(guò)計(jì)數(shù)小孔時(shí)引起的電阻變化進(jìn)行檢測(cè)為基礎(chǔ),進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測(cè)定。在等滲電解質(zhì)溶液(稀釋液) 中,有一個(gè)用于細(xì)胞計(jì)數(shù)的小孔管,其內(nèi)側(cè)充滿(mǎn)了稀釋液,并有一個(gè)內(nèi)電極,其外側(cè)細(xì)胞懸液(稀釋液) 中有一個(gè)外電極,小孔兩側(cè)的電極之間有穩(wěn)定的電流。細(xì)胞為相對(duì)不良導(dǎo)體,其導(dǎo)電性質(zhì)比稀釋液低,當(dāng)有一個(gè)細(xì)胞通過(guò)小孔時(shí),于瞬間引起了電壓變化而出現(xiàn)一個(gè)脈沖信號(hào)。脈沖的數(shù)量與細(xì)胞的數(shù)量成正比,脈沖的高度與細(xì)胞的體積成正比。脈沖信號(hào)經(jīng)放大、閾值調(diào)節(jié)、甄別、整形后,送入計(jì)數(shù)系統(tǒng)進(jìn)行處理,得出被測(cè)細(xì)胞的數(shù)量。
1、血液分析儀的工作原理 

       1947年，美國(guó)科學(xué)家?guī)鞝柼?W.H.Coulter)發(fā)明了粒子計(jì)數(shù)技術(shù)，它根據(jù)不導(dǎo)電顆粒經(jīng)過(guò)陰陽(yáng)電極間的充滿(mǎn)電解質(zhì)溶液的小孔時(shí)，會(huì)產(chǎn)生的瞬間電阻變化，來(lái)感知顆粒的大小和數(shù)量，91212稱(chēng)為電阻法原理，又稱(chēng)庫(kù)爾特原理。50年代初應(yīng)用于血細(xì)胞計(jì)數(shù)，依據(jù)血細(xì)胞非特異性的性質(zhì)，對(duì)電解質(zhì)溶液中懸浮顆粒(血細(xì)胞)在通過(guò)小孔時(shí)引起的電阻變化進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)市售的血液分析儀基本都采用該原理設(shè)計(jì)。另一種方法是光散射測(cè)量法，同電阻抗法一樣，全血標(biāo)本首先按一定比例稀釋成細(xì)胞懸液，在鞘液的作用下，形成細(xì)胞流，細(xì)胞被排列成單列快速通過(guò)光學(xué)檢測(cè)區(qū)，當(dāng)液流中的細(xì)胞與測(cè)定光束相交時(shí)，由于血細(xì)胞組成與鞘液不同，引起光散射變化，從不同角度檢測(cè)散射光信號(hào)，可以獲得與細(xì)胞體積結(jié)構(gòu)有關(guān)的信息，以此來(lái)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及體積測(cè)定。
 
2、血液分析儀配套試劑的類(lèi)型 

       血細(xì)胞分析儀在分析計(jì)數(shù)過(guò)程中采用庫(kù)爾特原理，根據(jù)細(xì)胞在測(cè)試過(guò)程中產(chǎn)生的脈沖幅度與儀器設(shè)備的閥值比較而得出。作為全血其細(xì)胞數(shù)量達(dá)10   個(gè)/L之多，直接通過(guò)小孔計(jì)數(shù)難以將每個(gè)細(xì)胞所形成的脈沖信號(hào)區(qū)分開(kāi)來(lái)，為此必須對(duì)全血進(jìn)行稀釋?zhuān)员阌趦x器計(jì)數(shù)，這就需要儀器使用最基本的試劑——稀釋液，以便對(duì)全血進(jìn)行稀釋。全血中白細(xì)胞數(shù)量約為10個(gè)/L，而紅細(xì)胞計(jì)數(shù)達(dá)10個(gè)/L，前者小于后者1000倍。如采用電阻抗法計(jì)數(shù)時(shí)，儀器只能識(shí)別有多少個(gè)顆粒，而無(wú)法識(shí)別哪個(gè)為紅細(xì)胞，哪個(gè)為白細(xì)胞。為了進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類(lèi)，儀器設(shè)計(jì)采用另一種試劑——溶血?jiǎng)梢詫⒓t細(xì)胞溶解掉 (溶血作用)，再進(jìn)行計(jì)數(shù)，就得出全血中白細(xì)胞數(shù)量。每份標(biāo)本測(cè)定完畢之后，都要對(duì)儀器管道、小孔、計(jì)數(shù)池等進(jìn)行清洗，以免相互干擾。所以?xún)x器還要用到起清洗作用的試劑——清洗劑。有些儀器功能較強(qiáng)，對(duì)白細(xì)胞還可進(jìn)行五分類(lèi)，此時(shí)還用到了鞘液、染色液等試劑。

3、血液分析儀配套試劑的作用 

       根據(jù)稀釋液在使用過(guò)程中所起的作用，要求其是具有酸堿緩沖作用，適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度和電導(dǎo)率的等滲液。適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度和與血漿相同的滲透壓能在一定時(shí)間內(nèi)完整地保持血細(xì)胞原來(lái)的體積 而合適的電導(dǎo)率能保證獲得與細(xì)胞體積，相應(yīng)的脈沖大小 溶血?jiǎng)﹦t是一類(lèi)強(qiáng)的表面活性劑，它的作用一方面是溶解紅細(xì)胞，進(jìn)行白細(xì)胞分類(lèi)與計(jì)數(shù)，另一個(gè)作用是溶解紅細(xì)胞，釋放出血紅蛋白(HGB)，形成穩(wěn)定的血紅蛋白衍生物，進(jìn)行血紅蛋白的測(cè)定。不同種類(lèi)的溶血?jiǎng)?duì)白細(xì)胞形狀、大小影響不同，如十六烷基三甲基溴化銨能使白細(xì)胞膜皺縮，胞體縮小，而皂素能使白細(xì)胞體積增大。同一種溶血?jiǎng)舛雀叩筒煌瑢?duì)白細(xì)胞體積影響也不同，通常是隨著溶血?jiǎng)舛仍龈撸准?xì)胞體積縮小，測(cè)量時(shí)脈沖也變小。隨著溶血?jiǎng)┑挠昧吭黾踊蛉苎獣r(shí)間的延長(zhǎng)，白細(xì)胞破裂，皺縮在細(xì)胞核周?chē)陌麧{顆粒及胞膜脫落，而僅剩細(xì)胞核。清洗劑則主要是清洗管道，避免標(biāo)本之間污染。 

注：本文由血液分析儀廠(chǎng)家普朗醫(yī)療網(wǎng)編發(fā)表，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處！