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1.初篩：

        （1）頭孢西汀（30μg/片）與頭孢西汀（30μg）/鄰氯西林（200μg）。后者比前者的抑菌圈≥5mm即疑為Ampc。

        （2）5種紙片篩選：馬斯平、泰能、頭孢西汀、頭孢他啶與頭孢他啶/克拉維酸。如頭孢西汀≤18mm，對馬斯平、泰能敏感即疑為產Ampc，如頭孢他啶與其酶抑制劑的抑菌圈≥5mm可能產ESBLS。

        2.確認試驗（頭孢西汀三維水相試驗法）

        3.三維水相試驗方法的改進

        （1）將標準菌株ATCC 25922按常規(guī)藥敏紙片K-B法操作均勻涂布于M-H平板上。

        （2）在M-H平板中心貼一片頭孢西汀(30ug/片) 紙片，在距紙片邊緣1cm處，用無菌手術刀片切3cm長度的小槽，將待測菌株的6個菌落接種于槽內(勿溢出槽外)，35℃孵育18-24h。

        （3）結果觀察：若抑菌圈向內凹陷，即AmpC酶陽性。

        ※三維水相試驗方法的改進(M-H平板打孔[2mm]擴散法).

        4.質粒型AmpC酶三聯(lián)紙片方法的檢測

        （1）將標準菌株ATCC 25922按常規(guī)藥敏紙片K-B法操作均勻涂布于M-H平板上。

        （2）在M-H平板中心貼一片頭孢西汀(30ug/片) 紙片，在紙片邊緣貼有待測菌的紙片（紙片上含20ul， PH8.0，1M Tris-0.1MEDTA）。

        （3）另一側邊緣貼有產AmpC酶菌的紙片（同上）。

        （4）35℃孵育18-24h，如待檢菌出現(xiàn)扁平或凹陷的抑菌環(huán)為陽性。

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