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DNA測(cè)序的原理是什么
DNA測(cè)序的原理是什么
加入時(shí)間：2014-03-04 10:30:25 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率：2878
DNA序列測(cè)定分手工測(cè)序和自動(dòng)測(cè)序，手工測(cè)序包括雙脫氧鏈終止法和化學(xué)降解法。自動(dòng)化測(cè)序?qū)嶋H上已成為當(dāng)今DNA序列分析的主流。
DNA測(cè)序一般是采用毛細(xì)管電泳技術(shù)取代傳統(tǒng)的聚丙烯酰胺平板電泳，目前，類似南京普東興、華大基因、達(dá)安基因等國(guó)內(nèi)基因測(cè)序公司，應(yīng)用的都是專利的四色熒光染料標(biāo)記的ddNTP(標(biāo)記終止物法)，因此通過(guò)單引物PCR測(cè)序反應(yīng)，生成的PCR產(chǎn)物則是相差1個(gè)堿基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈DNA混合物，使得四種熒光染料的測(cè)序PCR產(chǎn)物可在一根毛細(xì)管內(nèi)電泳，從而避免了泳道間遷移率差異的影響，大大提高了測(cè)序的精確度。由于分子大小不同，在毛細(xì)管電泳中的遷移率也不同，當(dāng)其通過(guò)毛細(xì)管讀數(shù)窗口段時(shí)，激光檢測(cè)器窗口中的CCD攝影機(jī)檢測(cè)器就可對(duì)熒光分子逐個(gè)進(jìn)行檢測(cè)，激發(fā)的熒光經(jīng)光柵分光，以區(qū)分代表不同堿基信息的不同顏色的熒光，并在CCD攝影機(jī)上同步成像，分析軟件可自動(dòng)將不同熒光轉(zhuǎn)變?yōu)镈NA序列，從而達(dá)到DNA測(cè)序的目的。分析結(jié)果能以凝膠電泳圖譜、熒光吸收峰圖或堿基排列順序等多種形式輸出。
DNA測(cè)序是近些年最常聽到的生物學(xué)詞匯，隨著基因測(cè)序技術(shù)的不斷發(fā)展許多測(cè)序公司也逐漸發(fā)展起來(lái)。DNA測(cè)序已經(jīng)不再是單一的只進(jìn)行科學(xué)研究，離人們的生活也越來(lái)越近。 |
