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        市場(chǎng)常規(guī)生化分析儀檢測(cè)方法有哪些?
        加入時(shí)間:2014-05-04 16:10:59  當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:2026

              在生化分析儀檢測(cè)過(guò)程中,由于待測(cè)樣品與試劑反應(yīng)的性質(zhì)不同,所使用的信號(hào)采集方法也有所不同。總的歸納起來(lái)有終點(diǎn)法、動(dòng)態(tài)法和兩點(diǎn)法這三種,為使大家對(duì)此有個(gè)清晰的了解,下面特對(duì)這三種方法進(jìn)行一個(gè)詳細(xì)的介紹:

              1、終點(diǎn)法:指經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的反應(yīng),反應(yīng)達(dá)到平衡,反應(yīng)液的吸光度不再變化,只與被測(cè)物的濃度有關(guān)。這類方法通常稱為“終點(diǎn)”法。通過(guò)醫(yī)療設(shè)備實(shí)驗(yàn)證實(shí),有色物質(zhì)溶液的顏色深度與其濃度有關(guān)。溶液的濃度越大,則所顯示的顏色越深。所以在比色分析中必須選擇合適的顯色條件和比色條件。顯色條件的選擇一般應(yīng)嚴(yán)格按照試劑單的要求進(jìn)行。比色條件的選擇主要是選擇合適的濾光片。即濾光片透光率最大的光波應(yīng)當(dāng)是溶液透光率最小的光波,也就是說(shuō)濾光片的顏色與溶液的顏色互為補(bǔ)色,由于有色溶液對(duì)它的互補(bǔ)色具有最大的吸收。

              還有個(gè)別的生化項(xiàng)目,有干擾成分存在。為了消除實(shí)驗(yàn)的干擾,采用雙波上進(jìn)行丈量。此方法的關(guān)鍵是如何選擇二個(gè)測(cè)定波長(zhǎng)λ1和λ2。選擇的原則是:使干擾組份在這兩個(gè)波優(yōu)點(diǎn)的吸光系數(shù)相等,而待測(cè)組份在這兩個(gè)波優(yōu)點(diǎn)吸光系數(shù)有明顯的差別。
         
               2、動(dòng)力學(xué)法:又稱零級(jí)動(dòng)力學(xué)法,指反應(yīng)速度與底物濃度的零次方成正比,也就是與底物濃度無(wú)關(guān)。因此,在整個(gè)反應(yīng)過(guò)程中,反應(yīng)物可以勻速地天生某個(gè)產(chǎn)物,導(dǎo)致被測(cè)定溶液在某一波長(zhǎng)下吸光度均勻地減小或增加,減小或增加的速度(ΔA/min)與被測(cè)物的活性或濃度成正比。動(dòng)力學(xué)法也被稱為連續(xù)監(jiān)測(cè)法或速率法;主要用于酶活性的測(cè)定。酶是由生物體產(chǎn)生并能在體內(nèi)外起催化作用的一類特殊蛋白質(zhì),體內(nèi)幾乎所有的代謝反應(yīng)都是在不同的酶催化下進(jìn)行的。酶的催化效率很高,而且非常不穩(wěn)定。人體內(nèi)酶濃度的變化能反映出很多疾病。同時(shí)酶的含量又很低,除免疫學(xué)方法外,不能直接測(cè)定其含量,只能測(cè)其催化反應(yīng)過(guò)程中一定時(shí)間內(nèi)物質(zhì)變化的量,即酶促反應(yīng)的速率,或稱酶的活力。通過(guò)測(cè)定底物濃度的下降或產(chǎn)物濃度的上升,可以追蹤酶促的反應(yīng)過(guò)程中底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的過(guò)程。酶促反應(yīng)過(guò)程可分為幾個(gè)時(shí)期。化學(xué)反應(yīng)的初始階段,底物和產(chǎn)物的變化不明顯,此期在幾秒到幾分鐘,稱為延遲期;隨后是底物和產(chǎn)物變化與時(shí)間成直線的時(shí)期,形成產(chǎn)物的速率恒定,稱為零級(jí)反應(yīng)期;接著是反應(yīng)速率持續(xù)下降,進(jìn)進(jìn)一級(jí)反應(yīng)期。

              3、固定時(shí)間法:又稱為一級(jí)動(dòng)力學(xué)法、二點(diǎn)動(dòng)力學(xué)法等,屬于帶標(biāo)準(zhǔn)的速率法,是動(dòng)態(tài)法的另一種形式。指在一定的反應(yīng)時(shí)間內(nèi),反應(yīng)速度與底物濃度的一次方成正比,即v=k[S]。由于底物在不斷的消耗,因此整個(gè)反應(yīng)速度在不斷的減小,表現(xiàn)為吸光度的變化越來(lái)越小。這類反應(yīng)達(dá)到平衡的時(shí)間很長(zhǎng),理論上可以在任意時(shí)間段進(jìn)行監(jiān)測(cè),但由于血清成份復(fù)雜,反應(yīng)剛啟動(dòng)時(shí)反應(yīng)較復(fù)雜,雜反應(yīng)較多,必須經(jīng)過(guò)一段延遲時(shí)間才能進(jìn)進(jìn)穩(wěn)定反應(yīng)期。

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