全自動生化分析儀-波長（Wave 1ength)的正確選擇有利于提高測定的靈敏度和減少測定誤差。全自動生化分析儀光度學方法有單波長和雙波長之分，有的醫療設備可用三波長、甚至多波長，以及兩波長比率等。有的醫療設備可作導數光譜分析。單波長測定易受樣品溶血、黃疸、脂濁等因素干擾。雙波長測定可以通過副波長加以修正，減少甚至消除干擾因素，提高測定準確性。采用同光束雙波長，亦有利于排除光源強度變化對結果的影響。

    測定波長選擇有三個主要條件：

    (1)待測物質在該波長下的光吸收最大。

    (2)其吸收峰宜較寬而鈍，而不是處于尖峰或陡肩，一般不選光譜中的末端吸收峰，換句話說，該吸收峰處的吸光度隨波長變化較小。

    (3)常見干擾物在該波長下的光吸收最小。試劑盒說明一般已提供波長參數。實際波長選擇需要了解待測物質和干擾組分對不同波長單色光的吸收程度，即以波長為橫坐標、吸光度為縱坐標作吸收光譜曲線(光吸收曲線)。

    采用透射免疫比濁法，免疫復合物大小約35~100mn之間，于波長290~410nm下有最大吸收峰，常取340nm；如用膠乳增強免疫濁度法，理想的檢測波長可增至可見光區。

    連續監測法中，要注意雙波長測定有兩種類型的機型：主波長全程監測副波長單點監測，和雙波長全程監測。不僅因為后者的準確性優于前者，而且因為酶活性測定的K值計算與波長及摩爾吸光系數有關，更顯重要。

    副波長單點監測：試劑和樣品混合后，雙波長只測一點，此后只用主波長連續監測；計算時，全部x主吸光度值均減去同一λ副吸光度值。K值計算代入主波長摩爾吸光系數即可。機型如Monarch 1000 ，Technicon RA 1000等。

    雙波長全程監測：全程每～測定點均用雙波長同測，并各自用λ主吸光度值減去λ副吸光度值。因為所測指示酶或產物在λ副波長時也存在一定的吸光系數，K值計算代入的摩爾吸光系數值應采用ε主減去ε副。如NADH的ε 為6．22×10 ， 為1．33×10 ，ALP產物ε 為18.5x×10 ，ε 為0.2×10 很小；GGT產物在副波長處無吸光系數。