常規熒光檢測是否可以應用于酶標儀?
加入時間:2014-06-11 11:00:43 當前新聞點擊率:3973
近年來,酶標儀的檢測方法正在不斷改革更新,越來越多的醫療器械廠家開始采用熒光探針作為檢測手段,其實這具有很多優勢,越來越多的基于其原理的檢測試劑盒問世。如何能更好的提高其檢測的靈敏度和線性范圍,降低其背景值,提高信噪比呢?
優化檢測結果的關鍵技術之一,酶標儀的核心部件單色器,主要作用是從波長范圍寬廣的光線中,分出波段較窄的單色光的裝置。問世最早的是濾片型酶標儀,其配合二向色鏡(其實也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統,可以滿足大部分實驗的需要。但是隨著實驗類型變化和檢測需求不斷提高,有時需要對激發和發射光譜進行研究,濾光片型酶標儀由于其濾片的數目限制,不能達到要求,故隨之誕生了光柵型的儀器。第一臺光柵型酶標儀是由Molecular Devices推出的,其在激發光和發射光處各有一個光柵,但是考慮到光純度不夠,所以在激發光柵和發射光柵的后面又加入了一組帶阻濾光片,對雜光進行二次過濾,其結果基本與純粹的濾光片系統一致。Molecular Devices的這項專利技術受到保護后,其它很多酶標儀廠家在光柵型酶標儀上面只能采用雙光柵系統來提高光純度,降低雜光率,即激發和發射各用了一組光柵,整個光路系統共四個光柵,所以也稱四光柵型酶標儀,雖然也能提高其對雜光過濾,但是由于多了一組光柵作用后,其光強度損失較大,檢測的靈敏度也會受到影響。
優化檢測結果的關鍵技術之二,光源選擇,不同的單色器對光的透射率不同,會影響檢測靈敏度,那么光源本身強度高低也會對實驗結果產生很大的影響,目前酶標儀比較普遍使用的光源分別為普通氙閃燈、高能氙閃燈和鹵素燈等。LED燈作為一種新光源以其自身許多優勢慢慢被許多酶標儀所采用,我們知道在同等效率下,LED燈壽命是傳統鹵素燈的10倍,免去了頻繁的更換燈泡和等待燈泡預熱所帶來的麻煩,其光源能量強、穩定性好,所以有助于提高熒光檢測的靈敏度。
傳統酶標儀是采用光路系統和檢測器系統一體式設計模式,模塊出廠就已經固定,不可以進行功能上的升級。市場上需要一種用戶可根據自己的要求進行隨意升級的多功能酶標儀,Molecular Devices針對市場需求推出了一款名為Paradigm多功能酶標儀。它將光源系統和檢測系統獨立分開,多套檢測器固定在主機上,針對不同實驗要求選用不同的卡盒,每一種卡盒其實就是獨立的光路系統,例如光吸收實驗在波長靈活性上要求較高,那么針對這樣的要求,光吸收卡盒采用光柵作為其單色器。