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動物疫病快速檢測儀之病毒蝕斑技術(shù)原理
動物疫病快速檢測儀之病毒蝕斑技術(shù)原理
加入時間：2012-07-17 10:41:43 當(dāng)前新聞點擊率：4426
病毒感染細(xì)胞后，由于固體介質(zhì)的限制，釋放的病毒只能由最初感染的細(xì)胞向周邊擴(kuò)展。經(jīng)過幾個增殖周期，便形成一個局限性病變細(xì)胞區(qū)，此即病毒蝕斑。
動物疫病快速檢測儀專家指出從理論上講，一個蝕斑是由最初感染細(xì)胞的一個病毒顆粒形成的，因而該項技術(shù)常用于病毒顆粒計數(shù)和分離病毒克隆。但在實際操作中，常出現(xiàn)幾個病毒顆粒同時感染一個細(xì)胞的情況，影響滴定的準(zhǔn)確性和克隆的純一性，為此，接種的病毒液要充分分散和稀釋。對于細(xì)胞結(jié)合性病毒，如MDV，需用單層細(xì)胞；對細(xì)胞釋放性病毒，即可用固相介質(zhì)懸浮的細(xì)胞，也可用單層細(xì)胞，但后者需用瓊脂等固體介質(zhì)蓋在細(xì)胞上，以防釋放的病毒在液體介質(zhì)中流動。固體介質(zhì)的濃度由病毒的大小而定，大病毒用濃度較低的介質(zhì)，小病毒用濃度較高的介質(zhì)，以便將蝕斑的生長速度控制在適宜的范圍內(nèi)。小蝕斑需用顯微鏡觀察，1-10mm的大蝕斑可用肉眼計數(shù)。
動物疫病快速檢測儀專家強調(diào)為便于肉眼觀察，常用中性紅等染料染色。因病變細(xì)胞不吸收中性紅，病變細(xì)胞區(qū)便呈現(xiàn)無色蝕斑。病毒懸液的滴度以每毫升蝕斑形成單位(PFU/ml)來表示。例如，3個細(xì)胞瓶的平均蝕斑是58，接種量為0.2ml，病毒的稀釋度為2.5×103 ，則病毒原液的滴度為：58÷0.2×2.5×103 ＝7.25×105 (PFU/ml) 上一篇:
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