普朗醫(yī)療器械公司知識——由于近些年，如何利用血液分析儀對外周血的血小板進行準確計數(shù)已經(jīng)成為了業(yè)界的討論焦點和研究對象。專家也在不斷的探究新的方法和計數(shù)。然而就目前而言，最為主要和普遍的方法就是免疫學測定法和二維激光散射法。

    1.免疫學測定法

    本法早在1988年即由Aulter提出，但最近幾年才深入研究并見諸實用。Dickerhoff(1995)和Matzdorff(1998)應用熒光標記抗血小板膜糖蛋白抗體，用FCM法計數(shù)血小板；Davis(1999),Gill(2000)和Harrison(2000)等進一步完善了這一方 法。所用的單抗，早期是抗CD41或CD42b，近來多用抗CD61，三種單抗效果相同。FCM方法都比較復雜，一般是先在流式血球儀上計數(shù)著染熒光的血 小板和計數(shù)紅細胞，先求出血小板/紅細胞之比值（下稱血小板比率），再用普通血液細胞分析儀計數(shù)同一患者的紅細胞數(shù)。然后以血小板比率×紅細胞數(shù)=血小板數(shù)。 Dickerhoff則改用已知其濃度的熒光微球代替紅細胞，先求出血小板/熒光微球之比值，再乘以熒光微球的濃度，即得到血小板數(shù)。上述方法都比較麻 煩，熒光微球價格高昂，難以在常規(guī)作中推廣使用。為此，Gill等改在Abbott公司的CELL-DYN4000型血液分析儀上，直接計數(shù)著熒光的血小 板，完全省去FCM法要先求血小板比率的步驟。由于用的是現(xiàn)成的儀器，而一般的血液分析儀，都已有一套成熟的操作、校準和質控系統(tǒng)，故計數(shù)結果比較準確， 可用于常規(guī)工作。
 
    2.二維激光散射法

    本法是最近幾年由Bayer公司研制的Advia 120型血液分析儀首先推出的。其設計原理是：根據(jù)同質性球體光散射的Mie理論（Mie theory of light scatter for homogenenous spheres）,當球形化的血小板一個一個地通過激光照射區(qū)時，在兩個角度進行測定：高角度（5°-15°）主要測細胞折射指數(shù)（refractive index,簡稱RI），它與細胞的密度有關：低角度（2°-3°），主要是測細胞的大小。血小的體積在1-30fL,RI在1.35-1.40之間。由 于紅細胞含有高濃度的血紅蛋白，其折射指數(shù)高（Ri可達1.44），故大血小板雖然可能與小紅細胞、紅細胞碎片、紅細胞殘骸（ghost）以及其它細胞碎 片的體積相似，但因為容物不同，RI相差較大，因二維散圖上可區(qū)別并分別計數(shù)。此法無需熒光標記的抗體。也沒有繁瑣的預處理步驟，可以隨常規(guī)工作與其它血 細胞計數(shù)同進進行，使用十分方便。我們已應用于實際工作中，效果甚好。

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